| 品牌： | JEPPS |
| 英文简称： | Human IP-10;CXCL10 ELISA Kit |
| 产品编号： | JPS-30103 |
| 货期： | 2-3个工作日 |
| 检测范围： | 5 pg/mL – 160 pg/mL |
| 灵敏度： | 1.0 pg/mL |
| 检测方法： | 双抗夹心法 |
| 上样体积： | 50UL |
| 特异性： | 可检测样本中人的P-10;CXCL10，且与其类似物无明显交叉反应 |
| 包装类型： | 盒装液体 |
| 储存条件： | 2-8℃ |
| 用途： | 仅用于科研 |
| 有效期： | 6个月 |
| 别名： | 人干扰素诱导蛋白10（IP-10;CXCL10）ELISA试剂盒，人干扰素诱导蛋白10ELISA试剂盒 |
实验原理：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人干扰素诱导蛋白10（IP-10;CXCL10）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人干扰素诱导蛋白10（IP-10;CXCL10）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成：
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
|---|---|---|---|
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
试剂盒参数：
| 性能 | |
|---|---|
| 灵敏度 | 1.0 pg/mL |
| 检测范围 | 5 pg/mL – 160 pg/mL |
| 重复性 | 板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。 |
| 特异性 | 可检测样本中人的P-10;CXCL10，且与其类似物无明显交叉反应 |
需自备的设备及试剂：
1. 450±10nm 滤光片酶标仪
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.
3. Eppendorf 移液器.
4. 蒸馏水或去离子水.
5. 脱脂棉吸水纸.
6. 37℃恒温箱.
8. 准备若干个标准品稀释管.
样本处理及要求：
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
5. 其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检测。
6. 样品外观：样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。
7. 样品保存：样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃（1个月内检测），或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
检测前准备工作：
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水
操作步骤：
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
?威尼斯登录中心-威尼斯人唯一官网 沪ICP备85698452号-2 丹若科技 seo技术支持：丹若云
